高效液相色譜儀實驗原理是什么？說到實驗室中的實驗用儀器，很多人都會想到高效液相色譜儀，很多人覺得高效液相色譜儀難以使用，其實不然，只要搞清楚高效液相色譜儀的實驗原理，就能輕松掌握其用法，那么高效液相色譜儀實驗原理是什么？下面就給大家詳細(xì)介紹一下。

高效液相色譜儀實驗原理是高效液相色譜法，什么是高效液相色譜法(HPLC)?

高壓液相色譜法確實開始成為二十世紀(jì)七十年代中晚期的普遍分析方法。隨著這一期間不斷的性能改進(jìn)(更小顆粒，更高壓力),字母縮寫保持一樣，但全稱變?yōu)楦咝?high-performance)液相色譜(HPLC)。高效液相色譜(HPLC)是目前分析化學(xué)最強大的工具之一。它能夠分離、定性和定量任何可以溶解在液體中的化合物。今天，痕量化合物甚至低至千萬分之一(ppt)也可。

一個儲液瓶裝有溶劑(稱為流動相，因為溶劑是流動的)。一個高壓泵(溶劑傳輸系統(tǒng)或稱溶劑管理器)用來產(chǎn)生和計量流動相的流速，一般是毫升/分鐘。一個進(jìn)樣器(樣品管理器或自動進(jìn)樣器)可以將樣品導(dǎo)入(注射)連續(xù)的流動相，并由流動相攜帶樣品進(jìn)入高效液相色譜柱。色譜柱裝有能獲得分離效果的填料。這種填料稱為固定相因為它被柱硬件包圍住。

檢測器用來查看化合物流出色譜柱時被分開的譜帶(大多數(shù)化合物沒有顏色，所以人眼觀察不到)。流動相流出檢測器可被送至廢液瓶，或按需被收集。當(dāng)流動相含有一個分開的化合物譜帶，高效液相色譜可以收集含有純化的化合物的該洗脫組分，用于進(jìn)一步分析。這種方法稱為制備液相(在高效液相色譜量級中討論)。注意高壓管路和附件用來連接泵、進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器單元，形成流動相、樣品和化合物分離譜帶的通路。

檢測器連接計算機數(shù)據(jù)站，高效液相色譜系統(tǒng)單元先記錄電信號，再將電信號轉(zhuǎn)換為色譜圖，在顯示屏上展現(xiàn)出來。定性和定量樣品內(nèi)溶物濃度(如圖F)。由于樣品中化合物性質(zhì)差異很大，幾種類型的檢測器被開發(fā)出來。例如，如果一個化合物能吸收紫外光，可使用紫外吸收檢測器。

如果這個化合物發(fā)熒光，可使用熒光檢測器。如果該化合物沒有上述性質(zhì)之一，可使用更廣泛的檢測器，如蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)。最強大的方式是順序使用多個檢測器。例如，紫外和/或蒸發(fā)光檢測器可和質(zhì)譜儀(MS)聯(lián)用來分析色譜分離的組分。這樣，從一次進(jìn)樣，可得到分析物的更多綜合的信息。將質(zhì)譜與高效液相色譜系統(tǒng)耦合稱之為液質(zhì)用。

以上就是高效液相色譜儀的實驗原理，我們要想正確的用好高效液相色譜儀就要了解其原理，只有理解了高效液相色譜儀的實驗原理，才能在實驗時準(zhǔn)確操作。如需繼續(xù)了解液相色譜儀相關(guān)消息或者更多相關(guān)資訊，歡迎閱讀《液相色譜儀如何選擇保護(hù)柱，選對保護(hù)柱實驗才能正常進(jìn)行[行業(yè)熱搜]》。